Цитологическое исследование мазков из шейки матки позволяет оценить состояние слизистой оболочки, наличие или отсутствие признаков патологических процессов (реактивных, предопухолевых, опухолей). При выявлении другими лабораторными методами инфекционного агента (вирус папилломы человека, бактериальные и паразитарные инфекции), цитологический метод позволяет оценить реакцию организма на инфекционный агент, наличие или отсутствие признаков повреждения, пролиферации, метаплазии или трансформации эпителия. Возможно также при исследовании мазка определить причину изменений эпителия (наличие воспаления с ориентировочным или уверенным определением патогенной микробиоты (микрофлоры), патологических процессов, связанных с гормональным, лекарственным, механическим, лучевым воздействием на организм женщины и шейку матки, состояний, чреватых опасностью возникновения дисплазии и рака шейки матки, а при их развитии установить правильный диагноз. В связи с этим цитологическое исследование применяют как при скрининге (мазки с визуально нормальной шейки матки), так и при наличии видимых при гинекологическом осмотре изменений слизистой оболочки.
Получение материала
Рак шейки матки чаще всего развивается в зоне трансформации, ему предшествуют фоновые процессы и внутриэпителиальные поражения (дисплазия эпителия), которые могут располагаться на небольших участках, поэтому важно, чтобы материал был получен со всей поверхности шейки матки, особенно из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия. Число измененных клеток в мазке бывает различным, и если их мало, то увеличивается вероятность, что патологические изменения могут быть пропущены при просмотре препарата. Для эффективного цитологического исследования необходимо учитывать:
- при профилактических осмотрах цитологические мазки следует брать у женщин независимо от жалоб, наличия или отсутствия изменений слизистой оболочки. Цитологическое исследование следует повторять не реже, чем раз в три года;
- желательно получать мазки не ранее, чем на 5-е сутки менструального цикла и не позднее, чем за 5 суток до предполагаемого начала менструации;
- нельзя брать материал в течение 48 ч после полового контакта, использования любрикантов, раствора уксуса или Люголя, тампонов или спермицидов, спринцевания, введения во влагалище медикаментов, свечей, кремов, в т. ч. кремов для выполнения ультразвукового исследования;
- беременность – не лучшее время для скрининга, так как возможны неправильные результаты, но, если нет уверенности, что женщина придет на обследование после родов, лучше мазки взять;
- при симптомах острой инфекции желательно получать мазки с целью обследования и выявления патологических изменений эпителия, этиологического агента; также необходим цитологический контроль после лечения, но не ранее, чем через 2 мес. после окончания курса.
Материал из шейки матки должен брать врач-гинеколог или (при скрининге, профилактическом осмотре) хорошо обученная медицинская сестра (акушерка).
Важно, чтобы в мазок попадал материал из зоны трансформации, так как около 90% опухолей исходит из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и зоны трансформации и только 10% из цилиндрического эпителия цервикального канала.
С диагностической целью материал получают раздельно из эктоцервикса (влагалищной порции шейки матки) и эндоцервикса (цервикального канала) с помощью шпателя и специальной щетки (типа Cytobrush). При проведении профилактического осмотра используют Cervex-Brush, различные модификации шпателя Эйра и другие приспособления для получения материала одновременно из влагалищной части шейки матки, зоны стыка (трансформации) и цервикального канала.
Перед получением материала шейку матки обнажают в “зеркалах”, дополнительных манипуляций не проводят (шейку не смазывают, слизь не удаляют; если слизи много – ее аккуратно снимают ватным тампоном, не надавливая на шейку матки.). Щетку (шпатель Эйра) вводят в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть приспособления по оси цервикального канала. Далее ее наконечник поворачивают на 360° (по часовой стрелке), достигая тем самым получения достаточного числа клеток из эктоцервикса и из зоны трансформации. Введение инструмента выполняют очень бережно, стараясь не повредить шейку матки. Затем щетку (шпатель) выводят из канала.
Что такое Пап-тест?
Наиболее распространенное цитологическое исследование выглядит следующим образом. Во время посещения гинекологического кабинета врач вводит кисточку с эластичными волокнами через зеркало, вставленное во влагалище, и, слегка поворачивая ее, собирает выделения вместе с отслоившимися клетками из шейного эпителия.
Затем гинеколог смазывает его на предметном стекле микроскопа и отправляет в лабораторию, где клетки оценивают цитолог или гистопатолог. Другой тип цитологии — тонкослойная цитология — отличается только тем, что секреты не размазываются на предметном стекле, а кисть помещается в емкость с консервирующей жидкостью, а клетки отделяются только в лаборатории. В любом случае, обследование занимает всего минуту и совершенно безболезненно. Пациентка может чувствовать только легкое трение и то не всегда. Чаще всего она ничего не чувствует.
Приготовление препаратов
Перенос образца на предметное стекло (традиционный мазок) должен происходить быстро, без подсушивания и потери прилипших к инструменту слизи и клеток. Обязательно перенести на стекло материал с обеих сторон шпателя или щетки.
Если предполагается приготовление тонкослойного препарата с помощью метода жидкостной цитологии, головку щетки отсоединяют от ручки и помещают в контейнер со стабилизирующим раствором.
Фиксация мазков
выполняется в зависимости от предполагаемого метода окрашивания.
Окрашивание по Папаниколау и гематоксилин-эозином наиболее информативны в оценке изменений эпителия шейки матки; любая модификация метода Романовского несколько уступает этим методам, однако при наличии опыта позволяет правильно оценить и характер патологических процессов в эпителии и микрофлору.
Клеточный состав мазков представлен слущенными клетками, находящимися на поверхности эпителиального пласта. При адекватном получении материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и из цервикального канала в мазок попадают клетки влагалищной порции шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и, при наличии плоскоклеточной метаплазии, метаплазированный эпителий) и клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий). Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято делить на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофических изменениях на поверхности эпителиального пласта расположены менее зрелые клетки.
Интерпретация результатов цитологического исследования
Наиболее распространенная в настоящее время – классификация Bethesda (The Bethesda System), разработанная в США в 1988 г, в которую вносили несколько изменений. Классификация создана для более эффективной передачи информации из лаборатории врачам клинических специальностей и обеспечения стандартизации лечения диагностированных нарушений, а также последующего наблюдения за больными.
В классификации Bethesda выделяют плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой и высокой степени (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade – LSIL и HSIL) и инвазивный рак. Плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени включают изменения, связанные с папилломавирусной инфекцией и слабой дисплазией (CIN I), высокой степени – умеренную дисплазию (CIN II), тяжелую дисплазию (CIN III) и внутриэпителиальный рак (cr in situ). В этой классификации имеются также указания на специфические инфекционные агенты, вызывающие заболевания, передавае мые половым путем.
Для обозначения клеточных изменений, которые трудно дифференцировать между реактивными состояниями и дисплазией предложен термин ASCUS – atypical squamous cells of undetermined significance (клетки плоского эпителия с атипией неясного значения). Для клинициста этот термин мало информативен, однако он нацеливает врача на то, что данная пациентка нуждается в обследовании и/или в динамическом наблюдении. В классификацию Bethesda в настоящее время введен также термин NILM – no intraepithelial lesion or malignancy, объединяющий норму, доброкачественные изменения, реактивные изменения.
Так как данные классификации используются в практике врача-цитолога, ниже приведены параллели между классификацией Bethesda и классификацией, распространенной в России (Табл. 22). Цитологическое стандартизованное заключениепо материалу из шейки матки (форма № 446/у), утверждено приказом Минздрава России от 24.04.2003 № 174.
Причины получения неполноценного материала различны, поэтому цитолог перечисляет типы клеток, обнаруженные в мазках и по возможности указывает причину, по которой материал признан неполноценным.
Цитологические изменения в железистом эпителии
| Bethesda Терминология, разработанная в г. Bethesda (США, 2001 г.) | Терминология, принятая в России |
| ОЦЕНКА КАЧЕСТВА МАЗКА | |
| Материал полноценный | Материал адекватный (дается описание клеточного состава мазка) |
| Материал недостаточно полноценный | Материал недостаточно адекватный (дается описание клеточного состава мазка) |
| Неудовлетворительный для оценки | Клеточного состава недостаточно для уверенного суждения о характере процесса |
| Удовлетворительный для оценки, но ограниченный чем-то (определить причину) | |
| В пределах нормы Метаплазия (норма) | Цитограмма без особенностей (в пределах нормы) – для репродуктивного возраста Цитограмма с возрастными изменениями слизистой оболочки: — атрофический тип мазка — атрофический тип мазка c лейкоцитарной реакцией Эстрогенный тип мазка у женщины в постменопаузе Атрофический тип мазка у женщины репродуктивного возраста |
| ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КЛЕТОК | |
| Инфекции | |
| Trichomonas vaginalis | Трихомонадный кольпит |
| Грибы, морфологически сходные с родом Candida | Обнаружены элементы гриба типа Candida |
| Кокки, гонококки | Обнаружены диплококки, расположенные внутриклеточно |
| Преобладание коккобациллярной флоры | Флора коккобациллярная, возможно, бактериальный вагиноз |
| Бактерии, морфологически сходные с Actinomyces | Флора типа Актиномицетов |
| Прочее | Флора типа Leptotrichia |
| Флора – мелкие палочки | |
| Флора – смешанная | |
| Клеточные изменения, связанные с вирусом Herpes simplex | Эпителий с изменениями, связанными с Herpes simplex |
| Возможно, хламидийная инфекция | |
| Реактивные изменения | |
| Воспалительные (включая репаративные) | Найденные изменения соответствуют воспалению с реактивными изменениями эпителия:дегенеративные, репаративные изменения, воспалительная атипия, плоскоклеточная метаплазия, гиперкератоз, паракератоз, и/или др. |
| Атрофия с воспалением (атрофический | Атрофический кольпит Атрофический тип мазка, лейкоцитарная реакция Эпителий слизистой оболочки с гиперкератозом Эпителий слизистой оболочки с паракератозом Эпителий слизистой оболочки с дискератозом Резервноклеточная гиперплазия Плоскоклеточная метаплазия Плоскоклеточная метаплазия с атипией |
| Лучевые изменения | Эпителий слизистой оболочки с лучевыми изменениями |
| Изменения, связанные с использованием внутриматочных контрацептивов | |
| ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЛОСКОГО ЭПИТЕЛИЯ | |
| Клетки плоского эпителия с атипией неясного значения (ASC-US*) Клетки плоского эпителия с атипией неясного значения не исключающие HSIL (ASC-Н) | Найденные изменения трудно дифференцировать между реактивными изменениями эпителия и дисплазией Обнаружены клетки, трактовка которых затруднена (с дискариозом, укрупненными ядрами, гиперхромными ядрами и т.д.) |
| Изменения плоского эпителия (не опухолевые, но достойные динамического наблюдения) | |
| Плоское интраэпителиальное поражение низкой степени (LSIL): папилломавирусная инфекция, слабая дисплазия (CIN I) | Эпителий слизистой оболочки с признаками папилломавирусной инфекции Найденные изменения, возможно, соответствуют слабой дисплазии. |
| Плоское интраэпителиальное поражение высокой степени (НSIL): умеренная, тяжелая дисплазия и внутриэпителиальный рак (CINII, CIN III) | Найденные изменения соответствуют умеренной дисплазии. Найденные изменения соответствуют тяжелой дисплазии. Найденные изменения подозрительны по наличию внутриэпителиального рака. |
| Инвазивный рак | |
| Плоскоклеточный рак | Плоскоклеточный рак Плоскоклеточный рак с ороговением Плоскоклеточный рак из мелких клеток |
| Железистая гиперплазия Найденные изменения соответствуют эндоцервикозу | |
| Атипичные клетки железистого эпителия (возможные предположения): – Неясного значения (AGUS); – подозрительные на неоплазию; – эндоцервикальная аденокарцинома in situ (AIS); – аденокарцинома | Железистая гиперплазия с атипией по типу дисплазии (I, II, III) Аденокарцинома |
| Клетки эндометрия цитологически доброкачественные (у женщины в менопаузе и т. д.) | |
| Аденокарцинома эндометрия Аденокарцинома другой локализации Аденокарцинома без дополнительной характеристики | Аденокарцинома, возможно аденокарцинома эндометрия Аденокарцинома БДУ (без дополнительного уточнения) |
| Другие злокачественные опухоли (по возможности определить нозологическую форму) | |
| Оценка гормонального статуса | |
* при возможности ASCUS должны быть определены как сходные с реактивными, репаративными или предраковыми процессами;
** изменения, связанные с воздействием вируса папилломы человека, ранее обозначаемые как койлоцитоз, койлоцитарная атипия, кондиломатозная атипия, включены в категорию слабо выраженных изменений клеток плоского эпителия;
*** по возможности следует отметить, относятся ли изменения к CIN II, CIN III, есть ли признаки cr in situ;
**** гормональная оценка (проводится только по вагинальным мазкам): – гормональный тип мазка соответствует возрасту и клиническим данным; – гормональный тип мазка не соответствует возрасту и клиническим данным: (расшифровать); – гормональная оценка невозможна в связи с: (указать причину).
Интеграция различных лабораторных методов
В диагностике заболеваний шейки матки важное значение имеют клинические данные, результаты исследования на микрофлору (классические микробиологические (культуральные), методы АНК (ПЦР, RT-PCR, Hybrid Capture, NASBA, и др.).
При необходимости уточнения патологического процесса (ASC-US, ASC-H) цитологическое исследование по возможности дополняют молекулярно биологическими (p16, онкогены, метилированная ДНК и др.).
Исследования для обнаружения ВПЧ имеют низкую прогностическую значимость, особенно у молодых женщин (до 30 лет), в связи с тем, что у большинства пациенток этой возрастной группы ВПЧ-инфекция имеет транзиторный характер. Однако несмотря на низкую специфичность теста в отношении интраэпителиальных опухолей и рака, именно у женщин моложе 30 лет он может использоваться в качестве скринингового с последующим цитологическим исследованием. Чувствительность и специфичность значительно увеличиваются при комплексном использовании цитологического метода и исследования для обнаружения ВПЧ, особенно у больных с сомнительными цитологическими данными. Этот тест важен при ведении пациенток с ASC-US, при динамическом наблюдении для определения риска рецидива или прогрессирования заболевания (CIN II, СIN III, carcinoma in situ, инвазивный рак).
Кто должен делать мазок Папаниколау чаще?
Бывает, что тест должен быть повторен, потому что, например, результат является неоднозначным или ложным из-за воспаления.
Если во время цитологического исследования клетки с аномальной структурой обнаруживаются хотя бы один раз, цитология не проверяется другой цитологией, потому что следующий результат может успокоить пациента, когда уже нужно действовать. Следует помнить, что классический тест Папаниколау имеет чувствительность около 60%.
